蛋白酶体β5亚单位过表达对氧化环境下人晶状体上皮细胞的影响
【目的】探讨蛋白酶体筇亚单位(PSMB5)基因过表达对氧化条件下晶状体上皮细胞的影响。【方法】构建重组质粒pcDNA3.1-PSMB5并将其转染人人晶状体上皮细胞株SRAO1/04中,形成稳定表达,同时设pcDNA3.1空载体为对照组。RT—PCR法及Western blot法分别检测PSMB5基因及蛋白的表达情况。H2O2分别作用PSMB5转染细胞及空载体转染细胞,MTT法检测细胞增殖能力的变化。【结果】转染后用G418筛选3周后,获得PSMB5转染及空载体转染的G418抗性的细胞克隆。转染PSMB5基因的细胞PSMB5 mRNA表达强度明显增高.而空载体转染细胞与未转染细胞无显著差异:转染...
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Main Authors: | , , , |
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Format: | Article |
Language: | zho |
Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2007-01-01
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Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
Subjects: | |
Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43582404/ |
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Summary: | 【目的】探讨蛋白酶体筇亚单位(PSMB5)基因过表达对氧化条件下晶状体上皮细胞的影响。【方法】构建重组质粒pcDNA3.1-PSMB5并将其转染人人晶状体上皮细胞株SRAO1/04中,形成稳定表达,同时设pcDNA3.1空载体为对照组。RT—PCR法及Western blot法分别检测PSMB5基因及蛋白的表达情况。H2O2分别作用PSMB5转染细胞及空载体转染细胞,MTT法检测细胞增殖能力的变化。【结果】转染后用G418筛选3周后,获得PSMB5转染及空载体转染的G418抗性的细胞克隆。转染PSMB5基因的细胞PSMB5 mRNA表达强度明显增高.而空载体转染细胞与未转染细胞无显著差异:转染PSMB5基因的细胞的PSMB5蛋白表达也显著高于空载体转染细胞。低浓度H2O2作用后,转染PSMB5基因的细胞增殖能力高于空载体转染细胞。【结论】低浓度氧化环境下蛋白酶体历亚单位PSMB5过表达能对人晶状体上皮细胞具有保护作用。 |
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ISSN: | 1672-3554 |