重组蛋白PTD-HSP27进入细胞保护视网膜神经节细胞抗氧化损伤
【目的】观察重组蛋白PTD-HSP27穿透视网膜视神经节细胞RGC-5的能力及其效率，测定重组蛋白PTD-HSP27对氯化钴（CoCl2）诱导的视网膜神经节细胞（RGC-5）细胞损伤的保护作用并初步探讨其机制。【方法】用FITC标记重组蛋白PTD-HSP27，荧光显微镜观察PTD-HSP27-FITC的穿透细胞膜的能力，用紫外分光光度计检测PTD-HSP27-FITC的穿膜效率，随后建立RGC-5细胞损伤模型。实验分为正常对照组、CoCl2损伤组、PTD-HSP27+CoCl2处理组，分别进行相应处理后，通过Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡比例；Western Blot...
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| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2019-01-01
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| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43546237/ |
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| author | 吴怡凝 陈梦婷 沙霄媛 刘莲 钟敬祥 |
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| author_sort | 吴怡凝 |
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| description | 【目的】观察重组蛋白PTD-HSP27穿透视网膜视神经节细胞RGC-5的能力及其效率，测定重组蛋白PTD-HSP27对氯化钴（CoCl2）诱导的视网膜神经节细胞（RGC-5）细胞损伤的保护作用并初步探讨其机制。【方法】用FITC标记重组蛋白PTD-HSP27，荧光显微镜观察PTD-HSP27-FITC的穿透细胞膜的能力，用紫外分光光度计检测PTD-HSP27-FITC的穿膜效率，随后建立RGC-5细胞损伤模型。实验分为正常对照组、CoCl2损伤组、PTD-HSP27+CoCl2处理组，分别进行相应处理后，通过Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡比例；Western Blotting检测各组细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3等凋亡相关蛋白的表达水平。【结果】荧光显微镜下观察到重组蛋白PTD-HSP27-FITC能够有效通过细胞膜进入RGC-5细胞内，其进入细胞的效率为（47.29±2.33）%。CoCl2浓度依赖性地抑制RGC-5细胞存活率。比较正常对照组、CoCl2损伤组和PTD-HSP27+CoCl2处理组的检测结果示：PTD-HSP27能有效抑制CoCl2诱导的RGC-5细胞早期凋亡（P<0.01）；PTD-HSP27能有效提高Bcl-2/Bax的表达比例，并抑制Caspase-3的激活（P<0.01）。【结论】重组蛋白PTD-HSP27能有效地穿过细胞膜进入RGC-5细胞内，且对CoCl2诱导的RGC-5细胞氧化应激损伤有保护作用，机制可能是通过调控Bcl-2/Bax的蛋白比例抑制细胞的早期凋亡。 |
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| institution | Kabale University |
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| language | zho |
| publishDate | 2019-01-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-e24094fa37424539badc383f800e70022025-01-15T02:34:53ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542019-01-014043546237重组蛋白PTD-HSP27进入细胞保护视网膜神经节细胞抗氧化损伤吴怡凝陈梦婷沙霄媛刘莲钟敬祥【目的】观察重组蛋白PTD-HSP27穿透视网膜视神经节细胞RGC-5的能力及其效率，测定重组蛋白PTD-HSP27对氯化钴（CoCl2）诱导的视网膜神经节细胞（RGC-5）细胞损伤的保护作用并初步探讨其机制。【方法】用FITC标记重组蛋白PTD-HSP27，荧光显微镜观察PTD-HSP27-FITC的穿透细胞膜的能力，用紫外分光光度计检测PTD-HSP27-FITC的穿膜效率，随后建立RGC-5细胞损伤模型。实验分为正常对照组、CoCl2损伤组、PTD-HSP27+CoCl2处理组，分别进行相应处理后，通过Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡比例；Western Blotting检测各组细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3等凋亡相关蛋白的表达水平。【结果】荧光显微镜下观察到重组蛋白PTD-HSP27-FITC能够有效通过细胞膜进入RGC-5细胞内，其进入细胞的效率为（47.29±2.33）%。CoCl2浓度依赖性地抑制RGC-5细胞存活率。比较正常对照组、CoCl2损伤组和PTD-HSP27+CoCl2处理组的检测结果示：PTD-HSP27能有效抑制CoCl2诱导的RGC-5细胞早期凋亡（P<0.01）；PTD-HSP27能有效提高Bcl-2/Bax的表达比例，并抑制Caspase-3的激活（P<0.01）。【结论】重组蛋白PTD-HSP27能有效地穿过细胞膜进入RGC-5细胞内，且对CoCl2诱导的RGC-5细胞氧化应激损伤有保护作用，机制可能是通过调控Bcl-2/Bax的蛋白比例抑制细胞的早期凋亡。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43546237/视网膜神经节细胞氧化损伤热休克蛋白27蛋白转导域细胞凋亡 |
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