抑制<italic>miR</italic>-<italic>4321</italic>减轻脓毒症相关急性肾脏损伤的作用和机制研究
目的本研究旨在探讨抑制<italic>miR-4321</italic>在改善脓毒症相关急性肾损伤（Sepsis associated acute kidney injury， SA-AKI）中的作用和机制。方法采用RT-qPCR方法检测LPS诱导的HK2细胞模型和CLP模型小鼠肾脏组织中<italic>miR-3165</italic>、<italic>miR-4270</italic>和<italic>miR-4321</italic>的表达水平。利用<italic>miR-4321...
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| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2022-11-01
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| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/doi/10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0608/ |
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| Summary: | 目的本研究旨在探讨抑制<italic>miR-4321</italic>在改善脓毒症相关急性肾损伤（Sepsis associated acute kidney injury， SA-AKI）中的作用和机制。方法采用RT-qPCR方法检测LPS诱导的HK2细胞模型和CLP模型小鼠肾脏组织中<italic>miR-3165</italic>、<italic>miR-4270</italic>和<italic>miR-4321</italic>的表达水平。利用<italic>miR-4321</italic>-Inhibitor抑制LPS诱导的HK2细胞损伤模型中<italic>miR-4321</italic>的表达，分别通过CCK-8分析、EdU染色分析和western blotting评估<italic>miR-4321</italic>对细胞增殖、细胞活力、细胞因子和凋亡相关蛋白水平的影响。利用<italic>miR-4321</italic>-Antago干预CLP模型小鼠肾组织中<italic>miR-4321</italic>的表达，通过H&E染色检测肾组织结构变化，比色法检测血清中肌酐和血尿氮水平，ELISA检测血清中白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达，IHC染色检测组织中mTOR水平，western blotting检测肾组织中凋亡相关蛋白表达水平。机制上，使用Targetscan软件预测<italic>miR-4321</italic>的靶基因，并通过双荧光素酶报告基因实验对靶基因进行验证。结果与对照组相比，LPS诱导的HK2细胞中<italic>miR-4321</italic>（<italic>n</italic>=3， <italic>t</italic>=7.154， <italic>P</italic>=0.001 3）表达升高；<italic>miR-4321</italic>-Inhibitor可促进HK2细胞增殖和细胞活力，并降低LPS诱导的IL-1β，IL-6和TNF-α水平的表达。体内实验证明<italic>miR-4321</italic>-Antago能够抑制CLP小鼠血清中肌酐和血尿氮水平，改善肾组织损伤，降低血清中IL-1β，IL-6和TNF-α水平，促进肾组织<italic>mTOR</italic>表达，抑制凋亡相关蛋白的表达。此外，<italic>mTOR</italic>是<italic>miR-4321</italic>的靶基因之一。结论抑制<italic>miR-4321</italic>可明显减轻脓毒症相关急性肾损伤，这一作用可能是通过增加<italic>mTOR</italic>的表达实现的。 |
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| ISSN: | 1672-3554 |