用聚合酶链反应快速检测痰液中结核杆菌

本研究以结核杆菌染色体中重复出现的长度为123个碱基对(bp)的DNA片段作为聚合酶链反应(PCR)扩增的模板,合成一对寡核苷酸引物。痰液标本先经三羟甲基氨基甲烷(Tris),乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)和三硝基甲苯(Tritonx-100)加热、震荡处理,裂解结核杆菌,再作PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳。同时,与痰液直接涂片、抗酸染色镜检抗酸染色阳性杆菌作比较。用该PCR检测的检出率为91.4%(32/35),而涂片抗酸染色的检出率仅为34.3%(12/35)。两者相比有非常显著性差异(x2=24.476,P<0.001)。由于改进了PCR前痰液标本的处理方法,使整个PCR检测过程所需时...

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Bibliographic Details
Format: Article
Language:zho
Published: Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University 1995-01-01
Series:Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban
Subjects:
Online Access:http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43590364/
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Summary:本研究以结核杆菌染色体中重复出现的长度为123个碱基对(bp)的DNA片段作为聚合酶链反应(PCR)扩增的模板,合成一对寡核苷酸引物。痰液标本先经三羟甲基氨基甲烷(Tris),乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)和三硝基甲苯(Tritonx-100)加热、震荡处理,裂解结核杆菌,再作PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳。同时,与痰液直接涂片、抗酸染色镜检抗酸染色阳性杆菌作比较。用该PCR检测的检出率为91.4%(32/35),而涂片抗酸染色的检出率仅为34.3%(12/35)。两者相比有非常显著性差异(x2=24.476,P<0.001)。由于改进了PCR前痰液标本的处理方法,使整个PCR检测过程所需时间缩短至9h。我们认为该PCR检测结核杆菌是特异、敏感和快速的,可在临床实验室应用。
ISSN:1672-3554