石蜡分隔的热启动PCR技术扩增血清HBV-DNA
将聚合酶链反应(PCR)成份分两组。先加一组含dNTPs、引物和MgCl2,并加1粒组织切片用石蜡凝固为盖层。再加另一组反应液含待扩增模板、TaqDNA聚合酶和KCl,以与第一组反应液分隔。PCR循环时高温可使中隔蜡层融化,两组反应液相混,蜡油上浮作为防蒸发屏障。由此避免室温混合加样和预置导致引物聚体形成和错导非特异扩增,提高PCR特异性和灵敏性。作者应用这一技术检测53例单项抗HBc阳性血清,检出HBVDNA13例,检测69例HBsAg阳性和抗HBe阳性血清,检出HBVDNA61例。而同样样本用标准PCR检测,HBVDNA阳性分别为10例和52例。两种方法对HBsAg和抗HBc双阳性血清的H...
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Format: | Article |
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Language: | zho |
Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
1995-01-01
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Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
Subjects: | |
Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43590800/ |
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collection | DOAJ |
description | 将聚合酶链反应(PCR)成份分两组。先加一组含dNTPs、引物和MgCl2,并加1粒组织切片用石蜡凝固为盖层。再加另一组反应液含待扩增模板、TaqDNA聚合酶和KCl,以与第一组反应液分隔。PCR循环时高温可使中隔蜡层融化,两组反应液相混,蜡油上浮作为防蒸发屏障。由此避免室温混合加样和预置导致引物聚体形成和错导非特异扩增,提高PCR特异性和灵敏性。作者应用这一技术检测53例单项抗HBc阳性血清,检出HBVDNA13例,检测69例HBsAg阳性和抗HBe阳性血清,检出HBVDNA61例。而同样样本用标准PCR检测,HBVDNA阳性分别为10例和52例。两种方法对HBsAg和抗HBc双阳性血清的HBVDNA检出率差别有显著意义(P<0.05)。 |
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institution | Kabale University |
issn | 1672-3554 |
language | zho |
publishDate | 1995-01-01 |
publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
spelling | doaj-art-67adf42a54a04c8c9e9cc81816f00a7d2025-01-15T03:40:22ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35541995-01-011643590800石蜡分隔的热启动PCR技术扩增血清HBV-DNA将聚合酶链反应(PCR)成份分两组。先加一组含dNTPs、引物和MgCl2,并加1粒组织切片用石蜡凝固为盖层。再加另一组反应液含待扩增模板、TaqDNA聚合酶和KCl,以与第一组反应液分隔。PCR循环时高温可使中隔蜡层融化,两组反应液相混,蜡油上浮作为防蒸发屏障。由此避免室温混合加样和预置导致引物聚体形成和错导非特异扩增,提高PCR特异性和灵敏性。作者应用这一技术检测53例单项抗HBc阳性血清,检出HBVDNA13例,检测69例HBsAg阳性和抗HBe阳性血清,检出HBVDNA61例。而同样样本用标准PCR检测,HBVDNA阳性分别为10例和52例。两种方法对HBsAg和抗HBc双阳性血清的HBVDNA检出率差别有显著意义(P<0.05)。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43590800/聚合酶链反应/方法乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸病毒/化学合成石蜡 |
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