miR-103通过抑制FBW7的表达促进肝癌细胞增殖

摘 要: 【目的】 研究miR-103对肝癌细胞增殖功能的影响及其作用机制。【方法】 Real time PCR方法检测miR-103在肝癌组织和细胞中的表达。将miR-103inhibitor转染到肝癌细胞中,分为实验组(转染miR-103 inhibitor)和对照组(转染Negative Control),通过MTT实验检测肝癌细胞的增殖变化。Realtime PCR和Western blotting检测转染miR-103 mimics后肝癌细胞中FBW7 mRNA和蛋白的表达变化。通过重荧光素酶报告基因实验检测转染miR-103mimics 或inhibitor后FBW7-3’UTR活...

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Bibliographic Details
Format: Article
Language:zho
Published: Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University 2014-01-01
Series:Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban
Subjects:
Online Access:http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43574338/
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Summary:摘 要: 【目的】 研究miR-103对肝癌细胞增殖功能的影响及其作用机制。【方法】 Real time PCR方法检测miR-103在肝癌组织和细胞中的表达。将miR-103inhibitor转染到肝癌细胞中,分为实验组(转染miR-103 inhibitor)和对照组(转染Negative Control),通过MTT实验检测肝癌细胞的增殖变化。Realtime PCR和Western blotting检测转染miR-103 mimics后肝癌细胞中FBW7 mRNA和蛋白的表达变化。通过重荧光素酶报告基因实验检测转染miR-103mimics 或inhibitor后FBW7-3’UTR活性的变化。【结果】 Real time PCR结果显示miR-103在肝癌组织和HepG2 细胞系中均高于癌旁组织和LO2肝细胞系(P< 0.05)。MTT实验结果显示,转染miR-103 inhibitor实验组肝癌细胞的存活细胞数低于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)。 Realtime PCR 和Western blotting结果显示,转染miR-103 mimics实验组肝癌细胞中FBW7的mRNA和蛋白表达水平都低于对照组.重荧光素酶报告基因实验结果显示,与对照组相比,转染miR-103mimics的实验组中FBW7-3’UTR报告基因活性显著降低(P < 0.05);与对照组相比,转染miR-103 inhibitor的实验组中FBW7-3’UTR活性显著升高(P< 0.05)。进一步实验发现,转染FBW7后能显著下调由miR-103 mimics所引起的细胞增殖作用。【结论】 miR-103可以通过抑制FBW7的表达来促进肝癌细胞增殖。
ISSN:1672-3554