miR-130b-5p下调胰岛素样生长因子-1抑制人绒毛膜滋养层细胞迁移及侵袭的作用及机制
目的探究微小RNA 130b-5p（miR-130b-5p）靶向胰岛素样生长因子-1（<italic>IGF-1</italic>）对人绒毛膜滋养层细胞（HTR8/SVneo）迁移及侵袭的影响。方法将HTR8/SVneo细胞分为对照组、miR-NC组、miR-130b-5pmimics组、miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1组和miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1组，双荧光素酶报告基因检测miR-130b-5p和IGF-1的靶向关系；采用实时荧光定量PCR检测HTR8/SVneo细胞样本中miR-130b-5p及<ita...
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| Main Authors: | , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2022-07-01
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| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/doi/10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0404/ |
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| _version_ | 1841535420000632832 |
|---|---|
| author | 相萌 张旭东 |
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| author_sort | 相萌 |
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| description | 目的探究微小RNA 130b-5p（miR-130b-5p）靶向胰岛素样生长因子-1（<italic>IGF-1</italic>）对人绒毛膜滋养层细胞（HTR8/SVneo）迁移及侵袭的影响。方法将HTR8/SVneo细胞分为对照组、miR-NC组、miR-130b-5pmimics组、miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1组和miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1组，双荧光素酶报告基因检测miR-130b-5p和IGF-1的靶向关系；采用实时荧光定量PCR检测HTR8/SVneo细胞样本中miR-130b-5p及<italic>IGF-1</italic>表达水平；采用CCK-8法检测HTR8/SVneo细胞增殖情况；采用全息细胞仪及Transwell法分析HTR8/SVneo细胞迁移、侵袭能力；Western blot法检测HTR8/SVneo细胞样本中IGF-1及侵袭、上皮间充质转化（EMT）蛋白表达情况。结果双荧光素酶报告基因结果显示，<italic>IGF-1</italic>是miR-130b-5p的潜在靶基因；相较于miR-NC组，miR-130b-5pmimics组中miR-130b-5p表达水平、细胞增殖抑制率、钙粘附蛋白E（E-cadherin）表达水平显著增加，IGF-1、c-Myc、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）表达水平、迁移距离、侵袭细胞数、基质金属蛋白酶9（MMP9）、基质金属蛋白酶2（MMP2）、神经型钙粘附蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）表达水平显著降低（<italic>P</italic>＜0.05）；相较于miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1组，miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1组中细胞增殖抑制率、E-cadherin表达水平显著降低，c-Myc、CyclinD1表达水平、迁移距离、侵袭细胞数、MMP9、MMP2、Vimentin和N-cadherin表达水平显著增加（<italic>P</italic>＜0.05）。结论miR-130b-5p过表达可能通过抑制<italic>IGF-1</italic>表达来抑制HTR8/SVneo细胞的迁移和侵袭。 |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2022-07-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-16532c6f22e24e3da2ed9e478fe304562025-01-15T02:32:36ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542022-07-014353954743481589miR-130b-5p下调胰岛素样生长因子-1抑制人绒毛膜滋养层细胞迁移及侵袭的作用及机制相萌张旭东目的探究微小RNA 130b-5p（miR-130b-5p）靶向胰岛素样生长因子-1（<italic>IGF-1</italic>）对人绒毛膜滋养层细胞（HTR8/SVneo）迁移及侵袭的影响。方法将HTR8/SVneo细胞分为对照组、miR-NC组、miR-130b-5pmimics组、miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1组和miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1组，双荧光素酶报告基因检测miR-130b-5p和IGF-1的靶向关系；采用实时荧光定量PCR检测HTR8/SVneo细胞样本中miR-130b-5p及<italic>IGF-1</italic>表达水平；采用CCK-8法检测HTR8/SVneo细胞增殖情况；采用全息细胞仪及Transwell法分析HTR8/SVneo细胞迁移、侵袭能力；Western blot法检测HTR8/SVneo细胞样本中IGF-1及侵袭、上皮间充质转化（EMT）蛋白表达情况。结果双荧光素酶报告基因结果显示，<italic>IGF-1</italic>是miR-130b-5p的潜在靶基因；相较于miR-NC组，miR-130b-5pmimics组中miR-130b-5p表达水平、细胞增殖抑制率、钙粘附蛋白E（E-cadherin）表达水平显著增加，IGF-1、c-Myc、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）表达水平、迁移距离、侵袭细胞数、基质金属蛋白酶9（MMP9）、基质金属蛋白酶2（MMP2）、神经型钙粘附蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）表达水平显著降低（<italic>P</italic>＜0.05）；相较于miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1组，miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1组中细胞增殖抑制率、E-cadherin表达水平显著降低，c-Myc、CyclinD1表达水平、迁移距离、侵袭细胞数、MMP9、MMP2、Vimentin和N-cadherin表达水平显著增加（<italic>P</italic>＜0.05）。结论miR-130b-5p过表达可能通过抑制<italic>IGF-1</italic>表达来抑制HTR8/SVneo细胞的迁移和侵袭。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/doi/10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0404/人绒毛膜滋养层细胞胰岛素样生长因子-1微小RNA 130b-5p迁移侵袭 |
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