人 CD134L 基因原核表达载体的构建、鉴定及序列分析
【目的】克隆人 CD134L 的 cDNA,构建人 CD134L 的原核表达载体 pGEX-4T-1/hCD134L,并进行序列分析。【方法】以 EB 病毒 转化健康人外周血 B 淋巴细胞,从激活的EB 病毒转化的 B细胞中提取总 RNA,采用 RT-PCR 方法扩增出人CD134L cDNA,经 BamHⅠ和 Sal Ⅰ双酶切后,克隆入原核表达载体 pGEX-4T-1,构建高效表达载体 pGEX-4T-1/CD134L,经限制性内切酶酶切分析和 cDNA 序列分析鉴定重组质粒。【结果】人CD134L cDNA 已正确克隆到原核表达载体 pGEX-4T-1 中,测序结果表明中国人CD134L...
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| Main Authors: | , , , |
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| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2002-01-01
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| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/44118965/ |
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| author | 张 强 张春艳 宁 波 陈琼玲 |
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| author_sort | 张 强 |
| collection | DOAJ |
| description | 【目的】克隆人 CD134L 的 cDNA,构建人 CD134L 的原核表达载体 pGEX-4T-1/hCD134L,并进行序列分析。【方法】以 EB 病毒 转化健康人外周血 B 淋巴细胞,从激活的EB 病毒转化的 B细胞中提取总 RNA,采用 RT-PCR 方法扩增出人CD134L cDNA,经 BamHⅠ和 Sal Ⅰ双酶切后,克隆入原核表达载体 pGEX-4T-1,构建高效表达载体 pGEX-4T-1/CD134L,经限制性内切酶酶切分析和 cDNA 序列分析鉴定重组质粒。【结果】人CD134L cDNA 已正确克隆到原核表达载体 pGEX-4T-1 中,测序结果表明中国人CD134L cDNA 与GenBank 国外报告的完全 一致。【结论】本研究成功构建人CD134L 的原核表达载体,为下一步进行人 CD134L 与自身免疫性疾病的关系奠定基础。 |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2002-01-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-04fb3fa3001f4164872bc978ac1163822025-01-15T04:01:42ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542002-01-012344118965人 CD134L 基因原核表达载体的构建、鉴定及序列分析张 强张春艳宁 波陈琼玲【目的】克隆人 CD134L 的 cDNA,构建人 CD134L 的原核表达载体 pGEX-4T-1/hCD134L,并进行序列分析。【方法】以 EB 病毒 转化健康人外周血 B 淋巴细胞,从激活的EB 病毒转化的 B细胞中提取总 RNA,采用 RT-PCR 方法扩增出人CD134L cDNA,经 BamHⅠ和 Sal Ⅰ双酶切后,克隆入原核表达载体 pGEX-4T-1,构建高效表达载体 pGEX-4T-1/CD134L,经限制性内切酶酶切分析和 cDNA 序列分析鉴定重组质粒。【结果】人CD134L cDNA 已正确克隆到原核表达载体 pGEX-4T-1 中,测序结果表明中国人CD134L cDNA 与GenBank 国外报告的完全 一致。【结论】本研究成功构建人CD134L 的原核表达载体,为下一步进行人 CD134L 与自身免疫性疾病的关系奠定基础。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/44118965/ |
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