EGCG阻断HDAC6-PI3K/AKT/mTOR轴以激活自噬促进小胶质细胞清除Aβ
目的为明确表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是否参与小胶质细胞对β-淀粉样蛋白（Aβ）的清除和自噬诱导，以探讨EGCG在防治阿尔茨海默病（AD）的潜在机制。方法将6月龄APP/PS1小鼠随机分为模型组和EGCG组，另将野生型小鼠作为对照组，每组15只，EGCG组持续灌胃给药［5 mg/（kg·d）］8周后，进行旷场实验及Y迷宫检测小鼠学习记忆能力，硫磺素-S染色评价小鼠脑实质中Aβ的含量及分布，免疫荧光检测小鼠海马组织Aβ<sub>1-42</sub>、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、离子钙结合适配器分子1（Iba1）表达水平；同时予20 µmol/L Aβ<su...
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| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2025-05-01
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| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/doi/10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ（med.sci）.2025.0313/ |
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| Summary: | 目的为明确表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是否参与小胶质细胞对β-淀粉样蛋白（Aβ）的清除和自噬诱导，以探讨EGCG在防治阿尔茨海默病（AD）的潜在机制。方法将6月龄APP/PS1小鼠随机分为模型组和EGCG组，另将野生型小鼠作为对照组，每组15只，EGCG组持续灌胃给药［5 mg/（kg·d）］8周后，进行旷场实验及Y迷宫检测小鼠学习记忆能力，硫磺素-S染色评价小鼠脑实质中Aβ的含量及分布，免疫荧光检测小鼠海马组织Aβ<sub>1-42</sub>、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、离子钙结合适配器分子1（Iba1）表达水平；同时予20 µmol/L Aβ<sub>1-42</sub>诱导N9小鼠胶质细胞模型，检测不同浓度EGCG（5 µmol/L、10 µmol/L、20 µmol/L）处理后的细胞活力，Western blot检测Aβ<sub>1-42</sub>、低密度脂蛋白受体相关蛋白1（LRP1）、晚期糖基化终末产物受体（RAGE）、淀粉样前体蛋白（APP）、胰岛素降解酶（IDE）、脑啡肽酶（NEP）、微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ/LC3-Ⅰ、磷脂酰肌醇-3-羟激酶（PI3K）、p-PI3K、蛋白激酶B （AKT）、p-AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、p-mTOR、组蛋白去乙酰化酶6（HDAC6）水平；最后通过小胶质细胞与神经元SH-SY5Y细胞共培养，检测细胞活力及Caspase-3水平，验证EGCG介导Aβ清除对神经元的保护作用。结果EGCG增加APP/PS1小鼠在旷场中央区域活动时间及次数（<italic>P</italic>＜0.05），提高Y迷宫测试交替百分比（<italic>P</italic>＜0.01）；EGCG减少APP/PS1小鼠海马组织中Aβ沉积，增加小胶质细胞数量；体外实验显示EGCG可提高Aβ诱导N9细胞的存活率（<italic>P</italic>＜0.01），并上调RAGE活性（<italic>P</italic>＜0.05），促进Aβ的内化吞噬（<italic>P</italic>＜0.01），通过下调HDAC6水平（<italic>P</italic>＜0.05），抑制PI3K、AKT、mTOR的磷酸化（<italic>P</italic>＜0.001）而增加LC3-Ⅱ/LC3-I比值（<italic>P</italic>＜0.001）激活小胶质细胞自噬；EGCG通过小胶质细胞对Aβ<sub>1-42</sub>的清除，提高SH-SY5Y细胞存活率（<italic>P</italic>＜0.05），降低Caspase-3的活性（<italic>P</italic>＜0.01），对神经元具有保护作用。结论EGCG通过靶向阻断HDAC6-PI3K/AKT/mTOR轴，激活小胶质细胞自噬清除Aβ。 |
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| ISSN: | 1672-3554 |