CircRNA_100395通过结合miR-144-3p抑制心肌成纤维细胞中纤维化相关基因的表达
【目的】研究环形 RNA circRNA_100395 调节心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达的作用机制。【方法】CircRNAs 表达谱芯片分析结合实时荧光定量 PCR 验证 circRNA_100395 在长期持续性房颤（AF）病人左心耳组织中的表达。检测血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）诱导人心房肌成纤维细胞（HAFs）中circRNA_100395 的表达及在细胞核质中分布情况。利用放线菌素D 实验检测circRNA_100395 的RNA 稳定性。制备重组circRNA_100395 腺病毒（rAd-circRNA_100395）并感染 HAFs，检测 HAFs 中纤维化相关基因 Col1a...
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| Main Authors: | , , , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2020-01-01
|
| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43723401/ |
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|---|---|
| author | 温艺红 杨真祯 朱杰宁 符永恒 方咸宏 单志新 |
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| author_sort | 温艺红 |
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| description | 【目的】研究环形 RNA circRNA_100395 调节心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达的作用机制。【方法】CircRNAs 表达谱芯片分析结合实时荧光定量 PCR 验证 circRNA_100395 在长期持续性房颤（AF）病人左心耳组织中的表达。检测血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）诱导人心房肌成纤维细胞（HAFs）中circRNA_100395 的表达及在细胞核质中分布情况。利用放线菌素D 实验检测circRNA_100395 的RNA 稳定性。制备重组circRNA_100395 腺病毒（rAd-circRNA_100395）并感染 HAFs，检测 HAFs 中纤维化相关基因 Col1a1、Col3a1 和 Acta2 的 mRNA 和蛋白表达。通过双荧光素酶报告基因实验和RNA pull-down 实验分别鉴定circRNA_100395 与微小RNA miR-144-3p 的结合作用。【结果】Masson 染色结果显示 AF 病人心耳组织的纤维化明显加重（P < 0.01）。CircRNA_100395 在AF 患者心耳组织中表达降低（P < 0.05），但在Ang-Ⅱ诱导的HAFs 中表达明显升高（P < 0.05），且主要分布于HAFs 细胞质内。放线菌素D 实验证明 circRNA_100395 的 RNA 稳定性明显高于其宿主基因 KLHL20 mRNA。过表达circRNA_100395 抑制 HAFs 中纤维化相关基因表达。双荧光素酶报告基因实验和 RNA Pull-down 实验均证实circRNA_100395 与miR-144-3p 存在特异性的结合作用。CircRNA_100395 可抑制miR-144-3p 促HAFs 中纤维化相关基因表达的作用。【结论】CircRNA_100395 通过特异结合miR-144-3p 来发挥抑制纤维化相关基因表达的作用。 |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2020-01-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-faa7379ea16b45df9359ae4363f59f592025-01-15T03:53:30ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542020-01-014143723401CircRNA_100395通过结合miR-144-3p抑制心肌成纤维细胞中纤维化相关基因的表达温艺红杨真祯朱杰宁符永恒方咸宏单志新【目的】研究环形 RNA circRNA_100395 调节心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达的作用机制。【方法】CircRNAs 表达谱芯片分析结合实时荧光定量 PCR 验证 circRNA_100395 在长期持续性房颤（AF）病人左心耳组织中的表达。检测血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）诱导人心房肌成纤维细胞（HAFs）中circRNA_100395 的表达及在细胞核质中分布情况。利用放线菌素D 实验检测circRNA_100395 的RNA 稳定性。制备重组circRNA_100395 腺病毒（rAd-circRNA_100395）并感染 HAFs，检测 HAFs 中纤维化相关基因 Col1a1、Col3a1 和 Acta2 的 mRNA 和蛋白表达。通过双荧光素酶报告基因实验和RNA pull-down 实验分别鉴定circRNA_100395 与微小RNA miR-144-3p 的结合作用。【结果】Masson 染色结果显示 AF 病人心耳组织的纤维化明显加重（P < 0.01）。CircRNA_100395 在AF 患者心耳组织中表达降低（P < 0.05），但在Ang-Ⅱ诱导的HAFs 中表达明显升高（P < 0.05），且主要分布于HAFs 细胞质内。放线菌素D 实验证明 circRNA_100395 的 RNA 稳定性明显高于其宿主基因 KLHL20 mRNA。过表达circRNA_100395 抑制 HAFs 中纤维化相关基因表达。双荧光素酶报告基因实验和 RNA Pull-down 实验均证实circRNA_100395 与miR-144-3p 存在特异性的结合作用。CircRNA_100395 可抑制miR-144-3p 促HAFs 中纤维化相关基因表达的作用。【结论】CircRNA_100395 通过特异结合miR-144-3p 来发挥抑制纤维化相关基因表达的作用。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43723401/心肌纤维化,人心房肌成纤维细胞,环状RNA,微小RNA |
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