兔关节软骨细胞的分离、培养和形态学特征
[目的] 探讨兔关节软骨细胞的分离、培养方法,观察单层高浓度培养时细胞表型表达情况。l方 法]无菌条件下,从2周龄新西兰白兔的颖颌关节及四肢关节棵突面削取软骨片,采用机械-酶消化法分离软骨 细胞,经台盼蓝拒染计数,将细胞按1X 106个/孔接种于6孔培养板,传代培养,描绘生长曲线。利用相差显微镜及透射电镜观察细胞形态。应用甲苯胺蓝及II型胶原免疫组化对细胞进行鉴定。(结果】每克软骨能获取 l.5xl06个软骨细胞,活性率为95%。培养2-3 d, 细胞贴壁、变形,呈多角形;8d左右,细胞融合成层。透射电 镜观察显示细胞核圆形,有丰富的粗面内质网、高尔基体及分泌的基质成分。甲苯胺蓝及II型胶原染...
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Main Authors: | , , , |
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Format: | Article |
Language: | zho |
Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2004-01-01
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Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43585479/ |
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author | 张志光 郑卫平 苏凯 许跃 |
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collection | DOAJ |
description | [目的] 探讨兔关节软骨细胞的分离、培养方法,观察单层高浓度培养时细胞表型表达情况。l方 法]无菌条件下,从2周龄新西兰白兔的颖颌关节及四肢关节棵突面削取软骨片,采用机械-酶消化法分离软骨 细胞,经台盼蓝拒染计数,将细胞按1X 106个/孔接种于6孔培养板,传代培养,描绘生长曲线。利用相差显微镜及透射电镜观察细胞形态。应用甲苯胺蓝及II型胶原免疫组化对细胞进行鉴定。(结果】每克软骨能获取 l.5xl06个软骨细胞,活性率为95%。培养2-3 d, 细胞贴壁、变形,呈多角形;8d左右,细胞融合成层。透射电 镜观察显示细胞核圆形,有丰富的粗面内质网、高尔基体及分泌的基质成分。甲苯胺蓝及II型胶原染色阳性。细 胞传至5代后,出现”成纤维细胞样"。[结论]本研究建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法;初代、第2代 细胞生长良好,适合于实验研究;软骨细胞5代培养后,细胞表型发生改变。 |
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institution | Kabale University |
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publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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