Circ_0018478通过编码HERC4-193发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用
目的探究环状RNA circ_0018478调控心肌成纤维细胞纤维化表型的作用和可能机制。方法RT-qPCR检测健康器官捐献者（<italic>n</italic>=18）和心衰（<italic>n</italic>=28）患者心肌中circ_0018478及其宿主基因含E3泛素蛋白连接酶4的HECT和RLD结构域（<italic>HERC4</italic>）的表达水平。荧光原位杂交（FISH）实验和核质RNA定量检测circ_0018478的细胞分布情况，放线菌素D干预实验和核糖核酸外切酶（RNase R）消化实验检测...
Saved in:
| Main Authors: | , , , , , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2022-11-01
|
| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/doi/10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0615/ |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Summary: | 目的探究环状RNA circ_0018478调控心肌成纤维细胞纤维化表型的作用和可能机制。方法RT-qPCR检测健康器官捐献者（<italic>n</italic>=18）和心衰（<italic>n</italic>=28）患者心肌中circ_0018478及其宿主基因含E3泛素蛋白连接酶4的HECT和RLD结构域（<italic>HERC4</italic>）的表达水平。荧光原位杂交（FISH）实验和核质RNA定量检测circ_0018478的细胞分布情况，放线菌素D干预实验和核糖核酸外切酶（RNase R）消化实验检测circ_0018478的RNA稳定性。过表达腺病毒介导的circ_0018478时，分别在RNA和蛋白水平检测乳小鼠心肌成纤维细胞（mCFs）中如Ⅰ型和Ⅲ型胶原等纤维化相关基因表达的影响。利用EdU染色和Trans-well细胞迁移实验鉴定circ_0018478对mCFs增殖和迁移能力的影响。质谱shot-gun分析circ_0018478可能翻译蛋白的肽段序列。利用小干扰RNA（siRNA）抑制HERC4-193表达，检测对circ_0018478调控mCFs纤维化表型的影响。结果在心衰病人心肌中，相较于无显著表达差异的宿主基因HERC4，环形RNA circ_0018478表达显著增加。FISH和核质分离实验结果证实circ_0018478主要定位于心肌细胞胞质中。放线菌素D和RNase R消化实验证实circ_0018478具有典型的RNA稳定性。过表达circ_0018478可抑制mCFs的增殖、迁移和纤维化相关基因的表达。质谱shot-gun和Western blot检测结果提示circ_0018478可翻译预期的HERC4-193蛋白。过表达circ_0018478和HERC4-193可一致地抑制mCFs的纤维化表型，而抑制HERC4-193表达可有效减弱circ_0018478抑制mCFs中纤维化相关基因表达的作用（<italic>P</italic><0.05）。结论Circ_0018478通过翻译蛋白HERC4-193发挥抑制心肌成纤维细胞纤维化表型的作用。 |
|---|---|
| ISSN: | 1672-3554 |