miR-155与<italic>CEBPB</italic>的靶向验证及繁殖性能相关基因的检测
<italic>CEBPB</italic>具有调节黄体生成促进排卵的作用，对动物繁殖性能极为重要，试验旨在通过构建<italic>CEBPB</italic>的3'端非翻译区（3'UTR）双荧光素酶报告基因载体，验证MicroRNA-155（miR-155）调控<italic>CEBPB</italic>的分子机制。应用在线生物信息学软件预测miR-155与<italic>CEBPB</italic>基因3'UTR的靶向结合区，PCR扩增获取民猪组织基因组的<i...
Saved in:
| Main Authors: | , , , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Department of Chinese Journal of Wildlife
2023-05-01
|
| Series: | 野生动物学报 |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://ysdw.nefu.edu.cn/thesisDetails#10.12375/ysdwxb.20230209 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| _version_ | 1841542593076264960 |
|---|---|
| author | 李军义 刘娣 马红 汪亮 霍秀鹏 郝丽 |
| author_facet | 李军义 刘娣 马红 汪亮 霍秀鹏 郝丽 |
| author_sort | 李军义 |
| collection | DOAJ |
| description | <italic>CEBPB</italic>具有调节黄体生成促进排卵的作用，对动物繁殖性能极为重要，试验旨在通过构建<italic>CEBPB</italic>的3'端非翻译区（3'UTR）双荧光素酶报告基因载体，验证MicroRNA-155（miR-155）调控<italic>CEBPB</italic>的分子机制。应用在线生物信息学软件预测miR-155与<italic>CEBPB</italic>基因3'UTR的靶向结合区，PCR扩增获取民猪组织基因组的<italic>CEBPB</italic>的3'UTR，将其插入psi-Check-2载体，构建野生型（wt-3'UTR）和突变型重组表达载体（mut-3'UTR），鉴定正确后，分别与miR-155模拟物（mimics）/抑制物（inhibitor）/阴性对照物（NC）共转染到PK15细胞，检测荧光素酶活性及<italic>CEBPB</italic>表达情况。结果表明：成功构建了<italic>CEBPB</italic>的3'UTR野生型和突变型表达载体，双荧光素酶报告基因检测显示wt-3'UTR/miR-155 mimics组的萤火虫荧光素酶活性受到显著抑制（<italic>p</italic><0.05）；而mut-3'UTR/miR-155 inhibitor组的萤火虫荧光素酶相对活性与对照组相比变化不显著（<italic>p</italic>>0.05）。实时荧光定量结果显示，miR-155 mimics组<italic>CEBPB</italic>、<italic>BMP1</italic>和<italic>PPARG</italic>表达水平显著低于miR-155 NC组（<italic>p</italic><0.05），而miR-155 inhibitor组<italic>CEBPB</italic>表达水平高于miR-155 NC组（<italic>p<</italic>0.05）。综上表明，miR-155可以靶向负调控<italic>CEBPB</italic>的表达。 |
| format | Article |
| id | doaj-art-e790fcefe52b46ac9baf5d020e5cb1f1 |
| institution | Kabale University |
| issn | 2310-1490 |
| language | zho |
| publishDate | 2023-05-01 |
| publisher | Editorial Department of Chinese Journal of Wildlife |
| record_format | Article |
| series | 野生动物学报 |
| spelling | doaj-art-e790fcefe52b46ac9baf5d020e5cb1f12025-01-14T04:06:35ZzhoEditorial Department of Chinese Journal of Wildlife野生动物学报2310-14902023-05-014430531237490573miR-155与<italic>CEBPB</italic>的靶向验证及繁殖性能相关基因的检测李军义刘娣马红汪亮霍秀鹏郝丽<italic>CEBPB</italic>具有调节黄体生成促进排卵的作用，对动物繁殖性能极为重要，试验旨在通过构建<italic>CEBPB</italic>的3'端非翻译区（3'UTR）双荧光素酶报告基因载体，验证MicroRNA-155（miR-155）调控<italic>CEBPB</italic>的分子机制。应用在线生物信息学软件预测miR-155与<italic>CEBPB</italic>基因3'UTR的靶向结合区，PCR扩增获取民猪组织基因组的<italic>CEBPB</italic>的3'UTR，将其插入psi-Check-2载体，构建野生型（wt-3'UTR）和突变型重组表达载体（mut-3'UTR），鉴定正确后，分别与miR-155模拟物（mimics）/抑制物（inhibitor）/阴性对照物（NC）共转染到PK15细胞，检测荧光素酶活性及<italic>CEBPB</italic>表达情况。结果表明：成功构建了<italic>CEBPB</italic>的3'UTR野生型和突变型表达载体，双荧光素酶报告基因检测显示wt-3'UTR/miR-155 mimics组的萤火虫荧光素酶活性受到显著抑制（<italic>p</italic><0.05）；而mut-3'UTR/miR-155 inhibitor组的萤火虫荧光素酶相对活性与对照组相比变化不显著（<italic>p</italic>>0.05）。实时荧光定量结果显示，miR-155 mimics组<italic>CEBPB</italic>、<italic>BMP1</italic>和<italic>PPARG</italic>表达水平显著低于miR-155 NC组（<italic>p</italic><0.05），而miR-155 inhibitor组<italic>CEBPB</italic>表达水平高于miR-155 NC组（<italic>p<</italic>0.05）。综上表明，miR-155可以靶向负调控<italic>CEBPB</italic>的表达。http://ysdw.nefu.edu.cn/thesisDetails#10.12375/ysdwxb.20230209繁殖性能<italic>CEBPB</italic>基因miR-155 |
| spellingShingle | 李军义 刘娣 马红 汪亮 霍秀鹏 郝丽 miR-155与<italic>CEBPB</italic>的靶向验证及繁殖性能相关基因的检测 野生动物学报 繁殖性能 <italic>CEBPB</italic>基因 miR-155 |
| title | miR-155与<italic>CEBPB</italic>的靶向验证及繁殖性能相关基因的检测 |
| title_full | miR-155与<italic>CEBPB</italic>的靶向验证及繁殖性能相关基因的检测 |
| title_fullStr | miR-155与<italic>CEBPB</italic>的靶向验证及繁殖性能相关基因的检测 |
| title_full_unstemmed | miR-155与<italic>CEBPB</italic>的靶向验证及繁殖性能相关基因的检测 |
| title_short | miR-155与<italic>CEBPB</italic>的靶向验证及繁殖性能相关基因的检测 |
| title_sort | mir 155与 italic cebpb italic 的靶向验证及繁殖性能相关基因的检测 |
| topic | 繁殖性能 <italic>CEBPB</italic>基因 miR-155 |
| url | http://ysdw.nefu.edu.cn/thesisDetails#10.12375/ysdwxb.20230209 |
| work_keys_str_mv | AT lǐjūnyì mir155yǔitaliccebpbitalicdebǎxiàngyànzhèngjífánzhíxìngnéngxiāngguānjīyīndejiǎncè AT liúdì mir155yǔitaliccebpbitalicdebǎxiàngyànzhèngjífánzhíxìngnéngxiāngguānjīyīndejiǎncè AT mǎhóng mir155yǔitaliccebpbitalicdebǎxiàngyànzhèngjífánzhíxìngnéngxiāngguānjīyīndejiǎncè AT wāngliàng mir155yǔitaliccebpbitalicdebǎxiàngyànzhèngjífánzhíxìngnéngxiāngguānjīyīndejiǎncè AT huòxiùpéng mir155yǔitaliccebpbitalicdebǎxiàngyànzhèngjífánzhíxìngnéngxiāngguānjīyīndejiǎncè AT hǎolì mir155yǔitaliccebpbitalicdebǎxiàngyànzhèngjífánzhíxìngnéngxiāngguānjīyīndejiǎncè |