抑制<italic>miR</italic>-<italic>4321</italic>减轻脓毒症相关急性肾脏损伤的作用和机制研究
目的本研究旨在探讨抑制<italic>miR-4321</italic>在改善脓毒症相关急性肾损伤（Sepsis associated acute kidney injury， SA-AKI）中的作用和机制。方法采用RT-qPCR方法检测LPS诱导的HK2细胞模型和CLP模型小鼠肾脏组织中<italic>miR-3165</italic>、<italic>miR-4270</italic>和<italic>miR-4321</italic>的表达水平。利用<italic>miR-4321...
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| Main Authors: | , , , , , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2022-11-01
|
| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/doi/10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0608/ |
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| _version_ | 1841535492950065152 |
|---|---|
| author | 张春敏 陈飞燕 杨文敏 林永敏 毛碧涛 陈洁 武志远 梁宇峰 |
| author_facet | 张春敏 陈飞燕 杨文敏 林永敏 毛碧涛 陈洁 武志远 梁宇峰 |
| author_sort | 张春敏 |
| collection | DOAJ |
| description | 目的本研究旨在探讨抑制<italic>miR-4321</italic>在改善脓毒症相关急性肾损伤（Sepsis associated acute kidney injury， SA-AKI）中的作用和机制。方法采用RT-qPCR方法检测LPS诱导的HK2细胞模型和CLP模型小鼠肾脏组织中<italic>miR-3165</italic>、<italic>miR-4270</italic>和<italic>miR-4321</italic>的表达水平。利用<italic>miR-4321</italic>-Inhibitor抑制LPS诱导的HK2细胞损伤模型中<italic>miR-4321</italic>的表达，分别通过CCK-8分析、EdU染色分析和western blotting评估<italic>miR-4321</italic>对细胞增殖、细胞活力、细胞因子和凋亡相关蛋白水平的影响。利用<italic>miR-4321</italic>-Antago干预CLP模型小鼠肾组织中<italic>miR-4321</italic>的表达，通过H&E染色检测肾组织结构变化，比色法检测血清中肌酐和血尿氮水平，ELISA检测血清中白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达，IHC染色检测组织中mTOR水平，western blotting检测肾组织中凋亡相关蛋白表达水平。机制上，使用Targetscan软件预测<italic>miR-4321</italic>的靶基因，并通过双荧光素酶报告基因实验对靶基因进行验证。结果与对照组相比，LPS诱导的HK2细胞中<italic>miR-4321</italic>（<italic>n</italic>=3， <italic>t</italic>=7.154， <italic>P</italic>=0.001 3）表达升高；<italic>miR-4321</italic>-Inhibitor可促进HK2细胞增殖和细胞活力，并降低LPS诱导的IL-1β，IL-6和TNF-α水平的表达。体内实验证明<italic>miR-4321</italic>-Antago能够抑制CLP小鼠血清中肌酐和血尿氮水平，改善肾组织损伤，降低血清中IL-1β，IL-6和TNF-α水平，促进肾组织<italic>mTOR</italic>表达，抑制凋亡相关蛋白的表达。此外，<italic>mTOR</italic>是<italic>miR-4321</italic>的靶基因之一。结论抑制<italic>miR-4321</italic>可明显减轻脓毒症相关急性肾损伤，这一作用可能是通过增加<italic>mTOR</italic>的表达实现的。 |
| format | Article |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2022-11-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
| record_format | Article |
| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-e1a74b18d8724b9bbc7dc24b893e144c2025-01-15T02:32:23ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542022-11-014392893743477188抑制<italic>miR</italic>-<italic>4321</italic>减轻脓毒症相关急性肾脏损伤的作用和机制研究张春敏陈飞燕杨文敏林永敏毛碧涛陈洁武志远梁宇峰目的本研究旨在探讨抑制<italic>miR-4321</italic>在改善脓毒症相关急性肾损伤（Sepsis associated acute kidney injury， SA-AKI）中的作用和机制。方法采用RT-qPCR方法检测LPS诱导的HK2细胞模型和CLP模型小鼠肾脏组织中<italic>miR-3165</italic>、<italic>miR-4270</italic>和<italic>miR-4321</italic>的表达水平。利用<italic>miR-4321</italic>-Inhibitor抑制LPS诱导的HK2细胞损伤模型中<italic>miR-4321</italic>的表达，分别通过CCK-8分析、EdU染色分析和western blotting评估<italic>miR-4321</italic>对细胞增殖、细胞活力、细胞因子和凋亡相关蛋白水平的影响。利用<italic>miR-4321</italic>-Antago干预CLP模型小鼠肾组织中<italic>miR-4321</italic>的表达，通过H&E染色检测肾组织结构变化，比色法检测血清中肌酐和血尿氮水平，ELISA检测血清中白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达，IHC染色检测组织中mTOR水平，western blotting检测肾组织中凋亡相关蛋白表达水平。机制上，使用Targetscan软件预测<italic>miR-4321</italic>的靶基因，并通过双荧光素酶报告基因实验对靶基因进行验证。结果与对照组相比，LPS诱导的HK2细胞中<italic>miR-4321</italic>（<italic>n</italic>=3， <italic>t</italic>=7.154， <italic>P</italic>=0.001 3）表达升高；<italic>miR-4321</italic>-Inhibitor可促进HK2细胞增殖和细胞活力，并降低LPS诱导的IL-1β，IL-6和TNF-α水平的表达。体内实验证明<italic>miR-4321</italic>-Antago能够抑制CLP小鼠血清中肌酐和血尿氮水平，改善肾组织损伤，降低血清中IL-1β，IL-6和TNF-α水平，促进肾组织<italic>mTOR</italic>表达，抑制凋亡相关蛋白的表达。此外，<italic>mTOR</italic>是<italic>miR-4321</italic>的靶基因之一。结论抑制<italic>miR-4321</italic>可明显减轻脓毒症相关急性肾损伤，这一作用可能是通过增加<italic>mTOR</italic>的表达实现的。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/doi/10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0608/脓毒症相关急性肾损伤脂多糖<italic>miR-4321</italic>mTOR |
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