miR-29a促进小鼠子宫内膜的蜕膜化

摘 要: 【目的】 探讨微小RNA29a(miR-29a)在小鼠子宫内膜基质细胞(ESC)蜕膜化中的作用。【方法】 收集孕第1~9天(D1 ~ D9)的小鼠子宫,通过实时定量PCR(qRT-PCR)的方法检测小鼠子宫组织中miR-29a的表达;构建去除卵巢及其甾体激素的处理模型,观察甾体激素对miR-29a表达的影响。采用雌二醇(E2)和孕酮(P4)对分离培养的小鼠子宫内膜基质细胞进行蜕膜化处理,并通过瞬时转染的方法下调miR-29a的表达,分别收集蜕膜化处理不同时间及干扰前后的细胞,采用qRT-PCR检测催乳素相关蛋白(dPRP)mRNA的表达,Western blot法检测细胞周期蛋白D3...

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Bibliographic Details
Format: Article
Language:zho
Published: Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University 2016-01-01
Series:Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban
Subjects:
Online Access:http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43573183/
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collection DOAJ
description 摘 要: 【目的】 探讨微小RNA29a(miR-29a)在小鼠子宫内膜基质细胞(ESC)蜕膜化中的作用。【方法】 收集孕第1~9天(D1 ~ D9)的小鼠子宫,通过实时定量PCR(qRT-PCR)的方法检测小鼠子宫组织中miR-29a的表达;构建去除卵巢及其甾体激素的处理模型,观察甾体激素对miR-29a表达的影响。采用雌二醇(E2)和孕酮(P4)对分离培养的小鼠子宫内膜基质细胞进行蜕膜化处理,并通过瞬时转染的方法下调miR-29a的表达,分别收集蜕膜化处理不同时间及干扰前后的细胞,采用qRT-PCR检测催乳素相关蛋白(dPRP)mRNA的表达,Western blot法检测细胞周期蛋白D3(cyclin D3)、孕酮受体(PR)蛋白的表达。 【结果】 在小鼠妊娠第1~5 天,子宫组织中的miR-29a 表达量较低,随着蜕膜化的进程(妊娠第6~9天),miR-29a的表达量均显著性增加(与妊娠D1相比);在去除卵巢及其甾体激素的处理模型中,一旦给予雌孕激素刺激,miR-29a的表达量显著增加;在小鼠子宫内膜基质细胞体外诱导蜕膜化过程中,qRT-PCR结果显示dPRP mRNA的表达以及miR-29a的表达随着蜕膜化时间的延长逐渐升高(与24 h相比),Western blot法显示蜕膜化标志分子cyclin D3、PR的表达也随着蜕膜化时间的延长逐渐升高;转染下调miR-29a后,蜕膜化标志分子及miR-29a的表达也相应下降。【结论】 妊娠早期miR-29a表达于母胎界面,且受子宫内膜蜕膜化的影响,说明miR-29a具有促进子宫内膜蜕膜化的作用。
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institution Kabale University
issn 1672-3554
language zho
publishDate 2016-01-01
publisher Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
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series Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban
spelling doaj-art-d48aa28cbe1a4d6db371a91fc4c2ef332025-01-15T02:40:13ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542016-01-013743573183miR-29a促进小鼠子宫内膜的蜕膜化摘 要: 【目的】 探讨微小RNA29a(miR-29a)在小鼠子宫内膜基质细胞(ESC)蜕膜化中的作用。【方法】 收集孕第1~9天(D1 ~ D9)的小鼠子宫,通过实时定量PCR(qRT-PCR)的方法检测小鼠子宫组织中miR-29a的表达;构建去除卵巢及其甾体激素的处理模型,观察甾体激素对miR-29a表达的影响。采用雌二醇(E2)和孕酮(P4)对分离培养的小鼠子宫内膜基质细胞进行蜕膜化处理,并通过瞬时转染的方法下调miR-29a的表达,分别收集蜕膜化处理不同时间及干扰前后的细胞,采用qRT-PCR检测催乳素相关蛋白(dPRP)mRNA的表达,Western blot法检测细胞周期蛋白D3(cyclin D3)、孕酮受体(PR)蛋白的表达。 【结果】 在小鼠妊娠第1~5 天,子宫组织中的miR-29a 表达量较低,随着蜕膜化的进程(妊娠第6~9天),miR-29a的表达量均显著性增加(与妊娠D1相比);在去除卵巢及其甾体激素的处理模型中,一旦给予雌孕激素刺激,miR-29a的表达量显著增加;在小鼠子宫内膜基质细胞体外诱导蜕膜化过程中,qRT-PCR结果显示dPRP mRNA的表达以及miR-29a的表达随着蜕膜化时间的延长逐渐升高(与24 h相比),Western blot法显示蜕膜化标志分子cyclin D3、PR的表达也随着蜕膜化时间的延长逐渐升高;转染下调miR-29a后,蜕膜化标志分子及miR-29a的表达也相应下降。【结论】 妊娠早期miR-29a表达于母胎界面,且受子宫内膜蜕膜化的影响,说明miR-29a具有促进子宫内膜蜕膜化的作用。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43573183/miR-29a基质细胞蜕膜化孕酮雌二醇
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