稳定表达人水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4的建立及应用
【目的】 建立一种可临床应用的并能稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,用于检测视神经脊髓炎患者血清中的AQP4抗体65377; 【方法】 构建有AQP4基因的表达载体,利用脂质体将载体转入HEK293细胞,G418筛选,RT-PCR65380;间接免疫荧光检测稳定细胞系中水通道蛋白4的表达及分布65377;细胞间接免疫荧光检测20例NMO患者65380;20例MS患者65380;30例健康对照血清中的AQP4抗体,并同鼠脑间接免疫荧光检测法比较65377; 【结果】 限制性酶切消化65380;PCR65380;测序结果证明载体构建成功65377;间接免疫荧光证实稳定细胞系中...
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| Format: | Article |
|---|---|
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2010-01-01
|
| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43577607/ |
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|---|---|
| collection | DOAJ |
| description | 【目的】 建立一种可临床应用的并能稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,用于检测视神经脊髓炎患者血清中的AQP4抗体65377; 【方法】 构建有AQP4基因的表达载体,利用脂质体将载体转入HEK293细胞,G418筛选,RT-PCR65380;间接免疫荧光检测稳定细胞系中水通道蛋白4的表达及分布65377;细胞间接免疫荧光检测20例NMO患者65380;20例MS患者65380;30例健康对照血清中的AQP4抗体,并同鼠脑间接免疫荧光检测法比较65377; 【结果】 限制性酶切消化65380;PCR65380;测序结果证明载体构建成功65377;间接免疫荧光证实稳定细胞系中有AQP4表达,且主要分布在细胞膜上65377;20 例NMO患者血清中11例NMO-IgG阳性,18例AQP4抗体阳性,滴度在1 ∶ 60 - 1 ∶ 15 360之间,而MS患者仅检测到1例阳性,健康对照未检测到阳性65377; 【结论】 成功构建稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4 ,并检测出国人NMO患者血清中存在AQP4抗体,且敏感性高于鼠脑法,可以有效的鉴别视神经脊髓炎和多发性硬化65377; 关键词: 视神经脊髓炎; NMO-IgG; 水通道蛋白4( AQP4); HEK293 |
| format | Article |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2010-01-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
| record_format | Article |
| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-ca87711910774148bdb9cc8d649b6fc02025-01-15T03:04:15ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542010-01-013143577607稳定表达人水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4的建立及应用【目的】 建立一种可临床应用的并能稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,用于检测视神经脊髓炎患者血清中的AQP4抗体65377; 【方法】 构建有AQP4基因的表达载体,利用脂质体将载体转入HEK293细胞,G418筛选,RT-PCR65380;间接免疫荧光检测稳定细胞系中水通道蛋白4的表达及分布65377;细胞间接免疫荧光检测20例NMO患者65380;20例MS患者65380;30例健康对照血清中的AQP4抗体,并同鼠脑间接免疫荧光检测法比较65377; 【结果】 限制性酶切消化65380;PCR65380;测序结果证明载体构建成功65377;间接免疫荧光证实稳定细胞系中有AQP4表达,且主要分布在细胞膜上65377;20 例NMO患者血清中11例NMO-IgG阳性,18例AQP4抗体阳性,滴度在1 ∶ 60 - 1 ∶ 15 360之间,而MS患者仅检测到1例阳性,健康对照未检测到阳性65377; 【结论】 成功构建稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4 ,并检测出国人NMO患者血清中存在AQP4抗体,且敏感性高于鼠脑法,可以有效的鉴别视神经脊髓炎和多发性硬化65377; 关键词: 视神经脊髓炎; NMO-IgG; 水通道蛋白4( AQP4); HEK293http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43577607/视神经脊髓炎NMO-IgG水通道蛋白4( AQP4)HEK293 |
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