放射诱导启动子的合成与鉴定及质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK 的构建
【目的】合成放射诱导启动子序列并构建其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1 (+)/ECDglyTK 。【方法】利用人工寡核苷酸片段合成放射诱导启动子, 以绿色荧光蛋白(GFP) 作为报告基因转染 Tca8113 细胞, 经流式细胞仪鉴定其辐射诱导特性。将pCEA-CDglyTK 中双自杀基因CDglyTK 亚克隆到 pcDNA3.1(+), 然后把合成启动子插入到CDglyTK 上游构建质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK 并酶切鉴定, 阳离子 脂质体介导其转染舌鳞癌Tca8113 细胞, RT-PCR 观察CDglyTK 表达及诱导放疗的增效作用。【结果】...
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| Main Authors: | , , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2005-01-01
|
| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43584640/ |
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|---|---|
| author | 余东升 黄洪章 潘朝斌 王安训 王建广 |
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| author_sort | 余东升 |
| collection | DOAJ |
| description | 【目的】合成放射诱导启动子序列并构建其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1 (+)/ECDglyTK
。【方法】利用人工寡核苷酸片段合成放射诱导启动子, 以绿色荧光蛋白(GFP) 作为报告基因转染
Tca8113 细胞, 经流式细胞仪鉴定其辐射诱导特性。将pCEA-CDglyTK 中双自杀基因CDglyTK 亚克隆到
pcDNA3.1(+), 然后把合成启动子插入到CDglyTK 上游构建质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK 并酶切鉴定, 阳离子
脂质体介导其转染舌鳞癌Tca8113 细胞, RT-PCR 观察CDglyTK 表达及诱导放疗的增效作用。【结果】合成启动
子序列分析与设计序列完全一致; 低剂量放射线照射可诱导这种人工启动子增强GFP 在Tca8113 细胞中的表
达; 重组质粒的酶切图谱与预期一致; 3 Gy 放疗显著增强CDglyTK 在Tca8113 细胞中的表达。【结论】成功合
成放射诱导启动子并构建由其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK, 为进一步研究肿瘤
放射- 基因治疗奠定了基础。 |
| format | Article |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2005-01-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
| record_format | Article |
| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-c13844da9bd04f38a1effe1aeab65a3f2025-01-15T03:18:01ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542005-01-012643584640放射诱导启动子的合成与鉴定及质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK 的构建余东升黄洪章潘朝斌王安训王建广【目的】合成放射诱导启动子序列并构建其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1 (+)/ECDglyTK 。【方法】利用人工寡核苷酸片段合成放射诱导启动子, 以绿色荧光蛋白(GFP) 作为报告基因转染 Tca8113 细胞, 经流式细胞仪鉴定其辐射诱导特性。将pCEA-CDglyTK 中双自杀基因CDglyTK 亚克隆到 pcDNA3.1(+), 然后把合成启动子插入到CDglyTK 上游构建质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK 并酶切鉴定, 阳离子 脂质体介导其转染舌鳞癌Tca8113 细胞, RT-PCR 观察CDglyTK 表达及诱导放疗的增效作用。【结果】合成启动 子序列分析与设计序列完全一致; 低剂量放射线照射可诱导这种人工启动子增强GFP 在Tca8113 细胞中的表 达; 重组质粒的酶切图谱与预期一致; 3 Gy 放疗显著增强CDglyTK 在Tca8113 细胞中的表达。【结论】成功合 成放射诱导启动子并构建由其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK, 为进一步研究肿瘤 放射- 基因治疗奠定了基础。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43584640/ |
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