小鼠端粒酶蛋白亚单位重组腺病毒载体的构建及鉴定

小鼠端粒酶蛋白亚单位重组腺病毒载体的构建及鉴定

【目的】构建小鼠端粒酶蛋白亚单位（mouse telomerase reverse transcriptase，mTERT）基因重组腺病毒载体，为下一步研究其体外表达和动物实验研究提供基础。【方法】从肝癌细胞中提取总RNA。采用RT-PER技术扩增mTERT的基因编码区序列，将序列定向克隆至真核表达载体pAC，将此表达质粒与腺病毒重组质粒pJM17共同转染293细胞，经同源重组产生重组腺病毒载体Ad-mTERT，纯化后的重组腺病毒载体Ad-mTERT在293细胞大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化，测定病毒滴度。【结果】PCR及酶切证实：mTERTDNA正确克隆到穿梭质粒pAC中，带mTER...

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Main Authors: 姜楠, 陆敏强, 李华, 蔡常洁, 杨扬, 许赤, 冯炼强, 陈规划
Format: Article
Language:zho
Published: Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University 2006-01-01
Series:Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban
Subjects:
小鼠端粒酶蛋白亚单位
重组腺病毒载体
Online Access:http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43585357/
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