ＨＧＦ与ＣＴＬＡ－４Ｉｇ双基因修饰增强脐带间充质干细胞的免疫抑制和促增殖作用

ＨＧＦ与ＣＴＬＡ－４Ｉｇ双基因修饰增强脐带间充质干细胞的免疫抑制和促增殖作用

【目的】 探讨人脐带间充质干细胞（ｈＵＣＭＳＣ）经肝细胞生长因子（ＨＧＦ）和细胞毒性Ｔ细胞相关抗原４免疫球蛋白（ＣＴＬＡ４－Ｉｇ）双基因修饰后免疫调节能力的变化及其促进肝细胞增殖作用的影响。【方法】 酶联合消化法提取并鉴定人脐带间充质干细胞；对照组的ｈＵＣＭＳＣ转染携带绿色荧光蛋白（ＥＧＦＰ）基因的Ａｄ５－ＥＧＦＰ，实验组的ｈＵＣＭＳＣ转染携带ＨＧＦ和ＣＴＬＡ－Ｉｇ双基因的腺病毒Ａｄ５－ＨＧＦ／ＣＴＬＡ－４Ｉｇ。流式细胞仪检测对照组ｈＵＣＭＳＣ转染Ａｄ５－ＥＧＦＰ后７２ ｈ表达ＥＧＦＰ细胞比率；实验组Ａｄ５－ＨＧＦ／ＣＴＬＡ－４Ｉｇ转染ｈＵＣＭＳＣ ７２ ｈ后，ＣＣＫ８检测细胞存活率，同时再次...

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Bibliographic Details
Format: Article
Language:zho
Published: Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University 2012-01-01
Series:Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban
Subjects:
间充质干细胞
脐带
人肝细胞生长因子
细胞毒性Ｔ细胞相关抗原４免疫球蛋白
免疫耐受
Online Access:http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43576021/
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collection DOAJ
description 【目的】 探讨人脐带间充质干细胞（ｈＵＣＭＳＣ）经肝细胞生长因子（ＨＧＦ）和细胞毒性Ｔ细胞相关抗原４免疫球蛋白（ＣＴＬＡ４－Ｉｇ）双基因修饰后免疫调节能力的变化及其促进肝细胞增殖作用的影响。【方法】 酶联合消化法提取并鉴定人脐带间充质干细胞；对照组的ｈＵＣＭＳＣ转染携带绿色荧光蛋白（ＥＧＦＰ）基因的Ａｄ５－ＥＧＦＰ，实验组的ｈＵＣＭＳＣ转染携带ＨＧＦ和ＣＴＬＡ－Ｉｇ双基因的腺病毒Ａｄ５－ＨＧＦ／ＣＴＬＡ－４Ｉｇ。流式细胞仪检测对照组ｈＵＣＭＳＣ转染Ａｄ５－ＥＧＦＰ后７２ ｈ表达ＥＧＦＰ细胞比率；实验组Ａｄ５－ＨＧＦ／ＣＴＬＡ－４Ｉｇ转染ｈＵＣＭＳＣ ７２ ｈ后，ＣＣＫ８检测细胞存活率，同时再次检测ｈＵＣＭＳＣ免疫表型和向成骨细胞分化的能力，ＥＬＩＳＡ检测细胞上清中ＨＧＦ含量，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测细胞中ＣＴＬＡ４－Ｉｇ蛋白的表达水平，通过ＣＣＫ８法检测双基因修饰后ｈＵＣＭＳＣ对淋巴细胞增殖的影响及其上清对Ｌ０２细胞增殖的影响。【结果】携带外源基因的腺病毒可有效转染ｈＵＣＭＳＣ，不影响其干细胞特性和多向分化能力，经ＨＧＦ／ＣＴＬＡ－４Ｉｇ基因修饰ｈＵＣＭＳＣ可分泌高浓度ＨＧＦ并高表达ＣＴＬＡ－４Ｉｇ，同时能有效地抑制淋巴细胞增殖，其上清能明显促进肝细胞增殖。【结论】 ｈＵＣＭＳＣ经ＨＧＦ／ＣＴＬＡ－４Ｉｇ基因修饰后生物学特性无明显改变，并能高表达ＨＧＦ和ＣＴＬＡ－４Ｉｇ，其免疫调节及促进肝细胞增殖的能力进一步加强，为肝移植术后存在的肝细胞损伤的保护治疗提供了新思路。
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institution Kabale University
issn 1672-3554
language zho
publishDate 2012-01-01
publisher Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
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series Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban
spelling doaj-art-a41f643d475747eaac91d459a292ff8f2025-01-15T03:00:24ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542012-01-013343576021ＨＧＦ与ＣＴＬＡ－４Ｉｇ双基因修饰增强脐带间充质干细胞的免疫抑制和促增殖作用【目的】 探讨人脐带间充质干细胞（ｈＵＣＭＳＣ）经肝细胞生长因子（ＨＧＦ）和细胞毒性Ｔ细胞相关抗原４免疫球蛋白（ＣＴＬＡ４－Ｉｇ）双基因修饰后免疫调节能力的变化及其促进肝细胞增殖作用的影响。【方法】 酶联合消化法提取并鉴定人脐带间充质干细胞；对照组的ｈＵＣＭＳＣ转染携带绿色荧光蛋白（ＥＧＦＰ）基因的Ａｄ５－ＥＧＦＰ，实验组的ｈＵＣＭＳＣ转染携带ＨＧＦ和ＣＴＬＡ－Ｉｇ双基因的腺病毒Ａｄ５－ＨＧＦ／ＣＴＬＡ－４Ｉｇ。流式细胞仪检测对照组ｈＵＣＭＳＣ转染Ａｄ５－ＥＧＦＰ后７２ ｈ表达ＥＧＦＰ细胞比率；实验组Ａｄ５－ＨＧＦ／ＣＴＬＡ－４Ｉｇ转染ｈＵＣＭＳＣ ７２ ｈ后，ＣＣＫ８检测细胞存活率，同时再次检测ｈＵＣＭＳＣ免疫表型和向成骨细胞分化的能力，ＥＬＩＳＡ检测细胞上清中ＨＧＦ含量，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测细胞中ＣＴＬＡ４－Ｉｇ蛋白的表达水平，通过ＣＣＫ８法检测双基因修饰后ｈＵＣＭＳＣ对淋巴细胞增殖的影响及其上清对Ｌ０２细胞增殖的影响。【结果】携带外源基因的腺病毒可有效转染ｈＵＣＭＳＣ，不影响其干细胞特性和多向分化能力，经ＨＧＦ／ＣＴＬＡ－４Ｉｇ基因修饰ｈＵＣＭＳＣ可分泌高浓度ＨＧＦ并高表达ＣＴＬＡ－４Ｉｇ，同时能有效地抑制淋巴细胞增殖，其上清能明显促进肝细胞增殖。【结论】 ｈＵＣＭＳＣ经ＨＧＦ／ＣＴＬＡ－４Ｉｇ基因修饰后生物学特性无明显改变，并能高表达ＨＧＦ和ＣＴＬＡ－４Ｉｇ，其免疫调节及促进肝细胞增殖的能力进一步加强，为肝移植术后存在的肝细胞损伤的保护治疗提供了新思路。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43576021/间充质干细胞脐带人肝细胞生长因子细胞毒性Ｔ细胞相关抗原４免疫球蛋白免疫耐受
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