视黄酸-AP-1信号通路对视网膜色素上皮细胞分泌TGF-β2的调控机制
【目的】研究上调视黄酸(RA)信号以及抑制活化蛋白-1(AP-1)转录活性对RPE分泌转化生长因子β2(TGF-β2)的影响以及可能的作用途径。【方法】①检测ATRA干预的作用,将ARPE-19细胞分为:正常对照组和6、12、24、48h组,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、western blot和免疫荧光检测RARβ和c-Fos的表达。②检测RARβ抑制剂LE540对ATRA诱导后细胞表达RARβ和c-Fos的影响,将ARPE-19细胞分为:正常对照组,ATRA组,LE540组和ATRA+LE540组,用RT-qPCR和western blot检测RARβ和c-Fos的表达。③检测A...
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Format: | Article |
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Language: | zho |
Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2019-01-01
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Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
Subjects: | |
Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/44095973/ |
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description | 【目的】研究上调视黄酸(RA)信号以及抑制活化蛋白-1(AP-1)转录活性对RPE分泌转化生长因子β2(TGF-β2)的影响以及可能的作用途径。【方法】①检测ATRA干预的作用,将ARPE-19细胞分为:正常对照组和6、12、24、48h组,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、western blot和免疫荧光检测RARβ和c-Fos的表达。②检测RARβ抑制剂LE540对ATRA诱导后细胞表达RARβ和c-Fos的影响,将ARPE-19细胞分为:正常对照组,ATRA组,LE540组和ATRA+LE540组,用RT-qPCR和western blot检测RARβ和c-Fos的表达。③检测AP-1抑制剂T-5224干预的作用,将ARPE-19细胞分为:正常对照组和12、24、48h组,用电泳迁移率变动分析法(EM?SA)检测RPE细胞中AP-1活性。④检测LE540和T-5224对ATRA诱导后细胞表达和分泌TGF-β2的影响,将ARPE-19细胞分为正常对照组,ATRA组,ATRA+LE540组和ATRA+T-5224组,用western blot和酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测TGF-β2的表达和分泌量。【结果】ATRA干预24和48h后,RARβ的表达较对照组明显升高(P<0.05),c-Fos的表达先升后降,ATRA干预6和12h后,c-Fos表达明显升高(P<0.01),而干预48h后,c-Fos表达下降,与对照组相比无统计学差异(P>0.05);T-5224干预24和48h后,AP-1的转录活性明显下降(P<0.01)。用LE540和T-5224干预48h后,ATRA+LE540组和ATRA+T-5224组TGF-β2的表达较ATRA组明显下降(P<0.05)。【结论】ATRA通过RARβ影响AP-1的转录活性,进而促进ARPE-19细胞分泌TGF-β2。 |
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institution | Kabale University |
issn | 1672-3554 |
language | zho |
publishDate | 2019-01-01 |
publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
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