甲状腺乳头状癌雌激素受体β表达及其 5′非翻译区甲基化
【目的】研究甲状腺乳头状癌(PTC)中雌激素受体β基因(ERβ)表达及 5′非翻译区甲基化状态,探讨ERβ在 PTC 中低表达的原因。【方法】应用 Western blot 和免疫组织化学染色法检测正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1、PTC 细胞 BCPAP 以及正常甲状腺组织、甲状腺结节性增生组织和 PTC 组织ERβ蛋白表达;应用 qRT-PCR 检测各细胞和组织中 ERβ mRNA(0K-1)、ERβ mRNA(0N-1)和总 ERβ mRNA 表达水平;亚硫酸氢盐测序分析各细胞和组织中 ERβ 基因启动子 0K、启动子 0N 和外显子 0N 的 CpG 岛甲基化状态;DNA 甲基化转...
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Main Authors: | , , |
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Format: | Article |
Language: | zho |
Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2020-01-01
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Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
Subjects: | |
Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43723576/ |
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author | 苟茜 许琳婉 刘智敏 |
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description | 【目的】研究甲状腺乳头状癌(PTC)中雌激素受体β基因(ERβ)表达及 5′非翻译区甲基化状态,探讨ERβ在 PTC 中低表达的原因。【方法】应用 Western blot 和免疫组织化学染色法检测正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1、PTC 细胞 BCPAP 以及正常甲状腺组织、甲状腺结节性增生组织和 PTC 组织ERβ蛋白表达;应用 qRT-PCR 检测各细胞和组织中 ERβ mRNA(0K-1)、ERβ mRNA(0N-1)和总 ERβ mRNA 表达水平;亚硫酸氢盐测序分析各细胞和组织中 ERβ 基因启动子 0K、启动子 0N 和外显子 0N 的 CpG 岛甲基化状态;DNA 甲基化转移酶抑制剂5-aza-2′-deoxycytidine(5-aza-dC)处理 Nthy-ori3-1 细胞和 BCPAP 细胞后,qRT-PCR 检测 ERβ mRNA(0K-1)、ERβ mRNA(0N-1)和总 ERβ mRNA 表达水平。【结果】与正常甲状腺细胞相比,ERβ蛋白表达水平在 PTC 细胞中明显下降(P<0.01);ERβ在正常甲状腺组织、结节性增生组织和 PTC 组织中阳性表达数分别为5/10 例、3/10 例、 0,与正常甲状腺组织相比,ERβ在 PTC 组织中的蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与正常甲状腺细胞和组织相比,ERβ mRNA(0N-1)和总 ERβ mRNA 在 PTC 中的表达水平明显降低(P<0.01),而 ERβ mRNA(0K-1)差异无统计学意义(P>0.05);ERβ基因启动子 0N 和外显子 0N 甲基化程度在 PTC 进程中逐渐增加,而启动子 0K 在常甲状腺、结节性增生和 PTC 组织和细胞中均未甲基化或低甲基化;5-aza-dC 使 BCPAP 细胞中ERβ mRNA(0N- 1)和总 ERβ mRNA 重新表达,但对 ERβ mRNA(0K-1)的表达无影响。【结论】ERβ基因 5′非翻译区甲基化使PTC 中 ERβ基因表达降低,尤其是启动子0N 和外显子 0N 异常甲基化。 |
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institution | Kabale University |
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publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
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