MicroRNA-99b-5p通过抑制成纤维细胞生长因子21表达促进心肌细胞肥大
目的研究微小RNA microRNA-99b-5p（miR-99b-5p）对心肌细胞肥大表型的调节作用及机制。方法实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测人心肌组织（包括健康对照者、心力衰竭患者心肌组织）以及横向主动脉缩窄（TAC） 手术小鼠心肌中miR-99b-5p的表达水平。血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）处理原代乳小鼠心肌细胞（NMVCs）后，利用鬼笔环肽染色呈现心肌细胞大小，RT-qPCR检测miR-99b-5p表达水平。利用RT-qPCR及蛋白质免疫印迹法检测转染miR-99b-5p mimic对NMVCs中肥大相关基因及成纤维细胞生长因子21（Fgf21）表达的影响。双萤光素酶报告实验验证...
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| Main Authors: | , , , , , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2022-03-01
|
| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/doi/10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0204/ |
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| _version_ | 1841535355706146816 |
|---|---|
| author | 陈丽文 郭晶 陈泽润 朱杰宁 徐金东 郭惠明 单志新 王晟 |
| author_facet | 陈丽文 郭晶 陈泽润 朱杰宁 徐金东 郭惠明 单志新 王晟 |
| author_sort | 陈丽文 |
| collection | DOAJ |
| description | 目的研究微小RNA microRNA-99b-5p（miR-99b-5p）对心肌细胞肥大表型的调节作用及机制。方法实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测人心肌组织（包括健康对照者、心力衰竭患者心肌组织）以及横向主动脉缩窄（TAC） 手术小鼠心肌中miR-99b-5p的表达水平。血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）处理原代乳小鼠心肌细胞（NMVCs）后，利用鬼笔环肽染色呈现心肌细胞大小，RT-qPCR检测miR-99b-5p表达水平。利用RT-qPCR及蛋白质免疫印迹法检测转染miR-99b-5p mimic对NMVCs中肥大相关基因及成纤维细胞生长因子21（Fgf21）表达的影响。双萤光素酶报告实验验证miR-99b-5p与Fgf21基因3'端非翻译区（3’UTR）的结合作用。利用腺病毒介导在NMVCs中过表达Fgf21及超氧化物歧化酶2（Sod2），并利用小干扰RNA（siRNA）敲低NMVCs中Fgf21和Sod2表达，研究Fgf21/Sod2轴是否介导miR-99b-5p对心肌细胞肥大表型的调节作用。结果MiR-99b-5p在心衰患者心肌组织、TAC术后的小鼠心肌组织及在AngⅡ处理的心肌细胞中均表达上调（ <italic>P</italic>＜0.01）。MiR-99b-5p可促进NMVCs中与肥大相关基因的表达（ <italic>P</italic>＜0.01）。双萤光素酶报告基因实验证实miR-99b-5p与Fgf21基因的3’UTR存在结合作用，并且miR-99b-5p可抑制Fgf21及其下游基因Sod2表达（ <italic>P</italic>＜0.05）。在NMVCs中过表达Fgf21或Sod2均可有效逆转miR-99b-5p的促心肌细胞肥大作用（ <italic>P</italic>＜0.05）。结论MiR-99b-5p在肥厚心肌中表达增加，并通过Fgf21/Sod2轴发挥促进心肌细胞肥大的作用。 |
| format | Article |
| id | doaj-art-6c922eae31794d4c82b41d555d38515d |
| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2022-03-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
| record_format | Article |
| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-6c922eae31794d4c82b41d555d38515d2025-01-15T02:32:58ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542022-03-014319220243484611MicroRNA-99b-5p通过抑制成纤维细胞生长因子21表达促进心肌细胞肥大陈丽文郭晶陈泽润朱杰宁徐金东郭惠明单志新王晟目的研究微小RNA microRNA-99b-5p（miR-99b-5p）对心肌细胞肥大表型的调节作用及机制。方法实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测人心肌组织（包括健康对照者、心力衰竭患者心肌组织）以及横向主动脉缩窄（TAC） 手术小鼠心肌中miR-99b-5p的表达水平。血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）处理原代乳小鼠心肌细胞（NMVCs）后，利用鬼笔环肽染色呈现心肌细胞大小，RT-qPCR检测miR-99b-5p表达水平。利用RT-qPCR及蛋白质免疫印迹法检测转染miR-99b-5p mimic对NMVCs中肥大相关基因及成纤维细胞生长因子21（Fgf21）表达的影响。双萤光素酶报告实验验证miR-99b-5p与Fgf21基因3'端非翻译区（3’UTR）的结合作用。利用腺病毒介导在NMVCs中过表达Fgf21及超氧化物歧化酶2（Sod2），并利用小干扰RNA（siRNA）敲低NMVCs中Fgf21和Sod2表达，研究Fgf21/Sod2轴是否介导miR-99b-5p对心肌细胞肥大表型的调节作用。结果MiR-99b-5p在心衰患者心肌组织、TAC术后的小鼠心肌组织及在AngⅡ处理的心肌细胞中均表达上调（ <italic>P</italic>＜0.01）。MiR-99b-5p可促进NMVCs中与肥大相关基因的表达（ <italic>P</italic>＜0.01）。双萤光素酶报告基因实验证实miR-99b-5p与Fgf21基因的3’UTR存在结合作用，并且miR-99b-5p可抑制Fgf21及其下游基因Sod2表达（ <italic>P</italic>＜0.05）。在NMVCs中过表达Fgf21或Sod2均可有效逆转miR-99b-5p的促心肌细胞肥大作用（ <italic>P</italic>＜0.05）。结论MiR-99b-5p在肥厚心肌中表达增加，并通过Fgf21/Sod2轴发挥促进心肌细胞肥大的作用。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/doi/10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2022.0204/心肌细胞肥大微小RNA-99-5p成纤维细胞生长因子21 |
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