SP600125抑制UVA激活皮肤成纤维细胞JNK通路 的最佳浓度

SP600125抑制UVA激活皮肤成纤维细胞JNK通路 的最佳浓度

【目的】 研究抑制UVA激活的皮肤成纤维细胞JNK通路的最佳SP600125浓度,为研究JNK信号通路在光老化中的作用机制奠定基础? 【方法】 原代培养取自儿童包皮的皮肤成纤维细胞?用CCK-8法结合荧光倒置显微镜研究不同剂量UVA和不同浓度SP600125及两者联合对皮肤成纤维细胞活性和形态的影响,以选择非细胞毒性的UVA剂量和SP600125浓度?再用Western-blot检测UVA辐照后不同时间点皮肤成纤维细胞中磷酸化c-Jun(P-c-Jun)表达以确定其被诱导表达的时间点?最后用Western-blot 检测不同浓度SP600125对UVA上调的P-c-Jun表达的抑制?【结果】...

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Bibliographic Details
Format: Article
Language:zho
Published: Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University 2014-01-01
Series:Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban
Subjects:
SP600125
c-Jun 氨基末端激酶通路
UVA
皮肤成纤维细胞
光老化
Online Access:http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43574406/
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Description
Summary:【目的】 研究抑制UVA激活的皮肤成纤维细胞JNK通路的最佳SP600125浓度,为研究JNK信号通路在光老化中的作用机制奠定基础? 【方法】 原代培养取自儿童包皮的皮肤成纤维细胞?用CCK-8法结合荧光倒置显微镜研究不同剂量UVA和不同浓度SP600125及两者联合对皮肤成纤维细胞活性和形态的影响,以选择非细胞毒性的UVA剂量和SP600125浓度?再用Western-blot检测UVA辐照后不同时间点皮肤成纤维细胞中磷酸化c-Jun(P-c-Jun)表达以确定其被诱导表达的时间点?最后用Western-blot 检测不同浓度SP600125对UVA上调的P-c-Jun表达的抑制?【结果】 UVA和SP600125分别辐照细胞和孵育细胞时,UVA≤10 J/cm2和SP600125≤2 μmol/L均能保持细胞活性在90% 以上?10 J/cm2 的UVA辐照不同浓度SP600125孵育的细胞时,≤800 nmol/L的SP600125孵育的细胞活性在90% 以上;1 μmol/L的SP600125使细胞活性明显下降至67.1%,镜下见部分细胞皱缩?碎裂?死亡;2 μmol/L的SP600125使细胞活性进一步下降至7.6%,镜下见绝大部分细胞变形?碎裂?死亡?Western-blot结果显示P-c-Jun在UVA辐照后0.75 h?1.5 h均较0 h升高,3 h后恢复至0 h水平?200 ~ 800 nmol/L SP600125呈剂量依赖性地抑制UVA上调的P-c-Jun表达,差异有统计学意义? 【结论】 低于常用浓度的200 ~ 800 nmol/L SP600125即可抑制UVA激活的皮肤成纤维细胞的JNK通路?JNK通路可能在UVA辐照的皮肤成纤维细胞中起抗凋亡作用?
ISSN:1672-3554

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