四种细胞因子组合从小鼠骨髓细胞体外诱导优势不成熟CD8a+DC
【目的】探索从小鼠骨髓细胞体外诱导大量优势不成熟CD8a+DC(DC2)的新方法。方法:取小鼠骨髓细胞,采用GM-CSF 5ng/ml,IL-4 20ng/ml,Flt3L 25ng/ml,SCF 100ng/ml四种细胞因子组合,37℃,5%CO2体外培养诱导。第3、7、16天流式细胞术4色荧光标记法分析细胞表型,细胞计数分析总细胞产量,采用电镜、免疫荧光及相差摄影观察细胞形态。【结果】小鼠骨髓细胞经GM-CSF+ IL-4+Flt3L+SCF 诱导第3天在CD11c+的DC细胞群中可产生97.09%的CD8a+优势DC2细胞(占总细胞的34.6%),其中CD8a+MHCⅡ-的不成熟DC占6...
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Format: | Article |
Language: | zho |
Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2008-01-01
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Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
Subjects: | |
Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43581955/ |
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Summary: | 【目的】探索从小鼠骨髓细胞体外诱导大量优势不成熟CD8a+DC(DC2)的新方法。方法:取小鼠骨髓细胞,采用GM-CSF 5ng/ml,IL-4 20ng/ml,Flt3L 25ng/ml,SCF 100ng/ml四种细胞因子组合,37℃,5%CO2体外培养诱导。第3、7、16天流式细胞术4色荧光标记法分析细胞表型,细胞计数分析总细胞产量,采用电镜、免疫荧光及相差摄影观察细胞形态。【结果】小鼠骨髓细胞经GM-CSF+ IL-4+Flt3L+SCF 诱导第3天在CD11c+的DC细胞群中可产生97.09%的CD8a+优势DC2细胞(占总细胞的34.6%),其中CD8a+MHCⅡ-的不成熟DC占61.77%;随培养时间延长比例下降,但培养第16天时CD8a+的不成熟DC仍占优势。总细胞计数分析显示随培养时间延长,细胞总数下降。电镜、免疫荧光及相差摄影等形态学检查显示所诱导的DC呈现典型树突状形态特征。【结论】GM-CSF+ IL-4+ Flt3L+SCF可以体外快速诱导小鼠骨髓细胞产生大量优势不成熟CD8a+ DC,是体外制备不成熟DC2的一种较好的新方法。 |
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ISSN: | 1672-3554 |