小鼠β2m 正义与反义RNA 表达载体的构建及鉴定
【目的】构建小鼠β2 微球蛋白基因(β2 microglobulin gene, β2 m)正义及反义RNA 表达载体, 为研究降低细胞 MHC Ⅰ 类分子的表达作准备。【方法】从小鼠基因组获得的β2 m 克隆中以β2m-pSV2ΔHXgpt 为模板, 合成两对引物, 采用常 规PCR 方法分别扩增出β2m 引导区及其下游主要编码区, 即外显子1 及部分外显子2, 然后利用重叠延伸法将两条片段拼 接起来, 再将其分别正向、反向插入载体pcDNA3, 并进行限制性内切酶酶切鉴定及序列分析。【结果】构建出小鼠β2 m 正义 和反义RNA 表达载体pcDNA3-β2mSN 及pcDNA3-β...
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| Main Authors: | , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2001-01-01
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| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43587612/ |
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|---|---|
| author | 孟 瑛 黄绍良 徐 劲 吴忠道 |
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| collection | DOAJ |
| description | 【目的】构建小鼠β2 微球蛋白基因(β2 microglobulin gene, β2 m)正义及反义RNA 表达载体, 为研究降低细胞
MHC Ⅰ 类分子的表达作准备。【方法】从小鼠基因组获得的β2 m 克隆中以β2m-pSV2ΔHXgpt 为模板, 合成两对引物, 采用常
规PCR 方法分别扩增出β2m 引导区及其下游主要编码区, 即外显子1 及部分外显子2, 然后利用重叠延伸法将两条片段拼
接起来, 再将其分别正向、反向插入载体pcDNA3, 并进行限制性内切酶酶切鉴定及序列分析。【结果】构建出小鼠β2 m 正义
和反义RNA 表达载体pcDNA3-β2mSN 及pcDNA3-β2mAN。【结论】克隆的正义及反义β2 m 经限制性内切酶酶切鉴定结果
正确, 测序分析结果与文献一致, 从而为下一步降低移植排斥反应的体内外研究奠定了基础。 |
| format | Article |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2001-01-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
| record_format | Article |
| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-1596d67135a64e3bb3dea62a4e72b2412025-01-15T03:34:43ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542001-01-012243587612小鼠β2m 正义与反义RNA 表达载体的构建及鉴定孟 瑛黄绍良徐 劲吴忠道【目的】构建小鼠β2 微球蛋白基因(β2 microglobulin gene, β2 m)正义及反义RNA 表达载体, 为研究降低细胞 MHC Ⅰ 类分子的表达作准备。【方法】从小鼠基因组获得的β2 m 克隆中以β2m-pSV2ΔHXgpt 为模板, 合成两对引物, 采用常 规PCR 方法分别扩增出β2m 引导区及其下游主要编码区, 即外显子1 及部分外显子2, 然后利用重叠延伸法将两条片段拼 接起来, 再将其分别正向、反向插入载体pcDNA3, 并进行限制性内切酶酶切鉴定及序列分析。【结果】构建出小鼠β2 m 正义 和反义RNA 表达载体pcDNA3-β2mSN 及pcDNA3-β2mAN。【结论】克隆的正义及反义β2 m 经限制性内切酶酶切鉴定结果 正确, 测序分析结果与文献一致, 从而为下一步降低移植排斥反应的体内外研究奠定了基础。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43587612/基因/MHC Ⅰ 类/&beta2 微球蛋白/小鼠/载体 |
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