红景天苷调控<italic>miRNA-1343-3p/MAP3K6/MMP24</italic>信号分子抑制胃癌细胞的增殖和侵袭
目的本研究旨在探讨红景天苷调控<italic>miR-1343-3p</italic>/<italic>MAP3K6</italic>（丝裂原激活激酶激酶激酶6）/<italic>MMP24</italic>（膜型基质金属蛋白酶24）信号分子，在抑制胃癌细胞增殖和迁移中的作用。方法将人胃癌细胞（MGC-803）按照红景天苷药物浓度不同分为对照组（0 μmol/mL）和低（6 μmol/mL）中（12 μmol/mL）高（24 μmol/mL）红景天苷剂量组；CCK-8实验检测红景天苷药物对人胃癌细胞抗增殖作用；克隆形成实验...
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| Main Authors: | , , , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2023-07-01
|
| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/doi/10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2023.0415/ |
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| _version_ | 1841535510305046528 |
|---|---|
| author | 田雨 王小平 江锋 曹晓岚 侯鑫睿 张振东 |
| author_facet | 田雨 王小平 江锋 曹晓岚 侯鑫睿 张振东 |
| author_sort | 田雨 |
| collection | DOAJ |
| description | 目的本研究旨在探讨红景天苷调控<italic>miR-1343-3p</italic>/<italic>MAP3K6</italic>（丝裂原激活激酶激酶激酶6）/<italic>MMP24</italic>（膜型基质金属蛋白酶24）信号分子，在抑制胃癌细胞增殖和迁移中的作用。方法将人胃癌细胞（MGC-803）按照红景天苷药物浓度不同分为对照组（0 μmol/mL）和低（6 μmol/mL）中（12 μmol/mL）高（24 μmol/mL）红景天苷剂量组；CCK-8实验检测红景天苷药物对人胃癌细胞抗增殖作用；克隆形成实验检测红景天苷药物对人胃癌细胞克隆形成能力的影响；Transwell实验检测红景天苷对人胃癌细胞侵袭能力的影响；细胞划痕实验检测红景天苷对人胃癌细胞迁移能力的影响；高通量测序（RNA-seq）检测了胃癌细胞在红景天苷作用后24 h时对照组和药物组miRNA和mRNA的表达量，将具有明显差异表达的miRNA聚类并预测其靶基因。通过Gene Ontology（GO）和KEGG富集分析，预测差异表达miRNA靶基因的相关功能及相关代谢通路，并建立miRNA与靶基因mRNA间的互作网络。免疫细胞荧光检测相关靶蛋白的表达；q-PCR检测相关候选基因的转录。结果CCK-8细胞毒性实验表明，红景天苷抑制了MGC-803细胞的增殖（<italic>P</italic> < 0.01）。细胞克隆形成实验表明，红景天苷降低了MGC-803细胞克隆形成能力（<italic>P</italic> < 0.000 1）。细胞侵袭实验表明，红景天苷降低了MGC-803细胞侵袭能力（<italic>P </italic>< 0.000 1）。划痕实验表明红景天苷降低了细胞迁移能力（<italic>P </italic>< 0.000 1）。高通量测序发现红景天苷作用人胃癌细胞后，有44个miRNA的表达量发生了显著差异性变化（<italic>P </italic>< 0.05），生物信息学分析结果显示差异表达miRNA所对应的靶mRNA有1 384个，红景天苷作用后引起抑癌因子<italic>miR-1343-3p</italic>表达明显上调（<italic>P </italic>< 0.01），而受其调控与增殖和迁移相关的<italic>MAP3K6</italic>和<italic>MMP24</italic>基因转录及表达明显下调（<italic>P </italic>< 0.05）。免疫荧光实验证明红景天苷降低了<italic>MAP3K6</italic>和<italic>MMP24</italic>基因的蛋白表达水平（<italic>P </italic>< 0.000 1）。q-PCR实验证明红景天苷降低了<italic>MAP3K6</italic>和<italic>MMP24</italic>基因的mRNA表达水平（<italic>P </italic>< 0.000 1），而<italic>miR-1343-3p</italic>基因的miRNA表达上调（<italic>P </italic>< 0.000 1）。结论红景天苷调控<italic>miRNA-1343-3p/MAP3K6/MMP24</italic>信号分子抑制胃癌细胞增殖和侵袭。 |
| format | Article |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2023-07-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
| record_format | Article |
| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-081d62792ba74900927c66303978a4902025-01-15T02:31:52ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542023-07-014465166243471944红景天苷调控<italic>miRNA-1343-3p/MAP3K6/MMP24</italic>信号分子抑制胃癌细胞的增殖和侵袭田雨王小平江锋曹晓岚侯鑫睿张振东目的本研究旨在探讨红景天苷调控<italic>miR-1343-3p</italic>/<italic>MAP3K6</italic>（丝裂原激活激酶激酶激酶6）/<italic>MMP24</italic>（膜型基质金属蛋白酶24）信号分子，在抑制胃癌细胞增殖和迁移中的作用。方法将人胃癌细胞（MGC-803）按照红景天苷药物浓度不同分为对照组（0 μmol/mL）和低（6 μmol/mL）中（12 μmol/mL）高（24 μmol/mL）红景天苷剂量组；CCK-8实验检测红景天苷药物对人胃癌细胞抗增殖作用；克隆形成实验检测红景天苷药物对人胃癌细胞克隆形成能力的影响；Transwell实验检测红景天苷对人胃癌细胞侵袭能力的影响；细胞划痕实验检测红景天苷对人胃癌细胞迁移能力的影响；高通量测序（RNA-seq）检测了胃癌细胞在红景天苷作用后24 h时对照组和药物组miRNA和mRNA的表达量，将具有明显差异表达的miRNA聚类并预测其靶基因。通过Gene Ontology（GO）和KEGG富集分析，预测差异表达miRNA靶基因的相关功能及相关代谢通路，并建立miRNA与靶基因mRNA间的互作网络。免疫细胞荧光检测相关靶蛋白的表达；q-PCR检测相关候选基因的转录。结果CCK-8细胞毒性实验表明，红景天苷抑制了MGC-803细胞的增殖（<italic>P</italic> < 0.01）。细胞克隆形成实验表明，红景天苷降低了MGC-803细胞克隆形成能力（<italic>P</italic> < 0.000 1）。细胞侵袭实验表明，红景天苷降低了MGC-803细胞侵袭能力（<italic>P </italic>< 0.000 1）。划痕实验表明红景天苷降低了细胞迁移能力（<italic>P </italic>< 0.000 1）。高通量测序发现红景天苷作用人胃癌细胞后，有44个miRNA的表达量发生了显著差异性变化（<italic>P </italic>< 0.05），生物信息学分析结果显示差异表达miRNA所对应的靶mRNA有1 384个，红景天苷作用后引起抑癌因子<italic>miR-1343-3p</italic>表达明显上调（<italic>P </italic>< 0.01），而受其调控与增殖和迁移相关的<italic>MAP3K6</italic>和<italic>MMP24</italic>基因转录及表达明显下调（<italic>P </italic>< 0.05）。免疫荧光实验证明红景天苷降低了<italic>MAP3K6</italic>和<italic>MMP24</italic>基因的蛋白表达水平（<italic>P </italic>< 0.000 1）。q-PCR实验证明红景天苷降低了<italic>MAP3K6</italic>和<italic>MMP24</italic>基因的mRNA表达水平（<italic>P </italic>< 0.000 1），而<italic>miR-1343-3p</italic>基因的miRNA表达上调（<italic>P </italic>< 0.000 1）。结论红景天苷调控<italic>miRNA-1343-3p/MAP3K6/MMP24</italic>信号分子抑制胃癌细胞增殖和侵袭。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/doi/10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2023.0415/微小RNA红景天苷胃癌细胞差异表达调控机制 |
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